【摘要】目的建立测定注射用甲硫氨酸维B1中甲硫氨酸和维生素B1的含量的方法。方法用高效液相色谱法，色谱柱：ODSC18柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相：缓冲液［取庚烷磺酸钠0.25g，用磷酸钠溶液（取磷酸钠38g,加水至1000mL使溶解，用磷酸调pH值至2.1）溶解并稀释成1000mL］乙腈（体积比94∶6），流速1.0mL/min，检测波长为210nm。结果甲硫氨酸在0.60～1.40mg/mL浓度范围内线性关系良好（r=0.9996），维生素B1在0.06~0.14mg/mL浓度范围内线性关系良好（r=0.9998）；平均回收率分别为：甲硫氨酸100.49%　（RSD为0.62%）,维生素B199.95%（RSD为0.48%）。结论本法简便、快速、灵敏、准确，重现性好，可作为注射用甲硫氨酸维B1中甲硫氨酸和维生素B1的含量测定方法。

【关键词】高效液相色谱法；注射用甲硫氨酸维生素B1；甲硫氨酸；维生素B1

　　注射用甲硫氨酸维B1为甲硫氨酸和维生素B1的复合制剂。本品对于急慢性肝炎、肝硬化，尤其是对脂肪肝有特别的疗效；可用于肝内胆汁郁积以及乙醇、巴比妥类、磺胺类药物中毒时的辅助治疗；并可作为治疗神经炎和心肌炎的辅助药物。目前对其注射剂及冻干粉针剂的含量测定已有文献报道［1-3］。为有效控制产品质量，本文直接采用HPLC法测定其主要成分甲硫氨酸和维生素B1的含量，方法简便，结果准确。

　　1仪器与试药

　　日本岛津高效液相色谱仪（SPD10Avp检测器,LC10Atvp泵），工作站：AnaStar色谱处理系统，色谱柱：KromasilC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）。

　　甲硫氨酸对照品（批号为140684200401）、维生素B1对照品（批号为100390200502）由中国药品生物制品检定所提供；注射用甲硫氨酸维B1（本公司自制，批号为050318、050319、050320，规格：甲硫氨酸40mg与维生素B14mg）；乙腈为色谱纯，庚烷磺酸钠、磷酸钠、磷酸为分析纯。

　　2方法与结果

　　2.1色谱条件色谱柱:ODSC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；流速:1.0mL/min；检测波长：210nm；流动相：以缓冲液［取庚烷磺酸钠0.25g，用磷酸钠溶液（取磷酸钠38g,加水至1000mL使溶解，用磷酸调pH值至2.1）溶解并稀释成1000mL］乙腈（体积比94∶6）；进样量：20μL；测定方法：外标法，积分峰面积。

　　2.2对照品溶液的制备精密称定甲硫氨酸对照品50mg和维生素B1对照品5mg，置同一50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

　　2.3供试品溶液的制备取本品细粉适量（约相当于甲硫氨酸50mg），精密称定，置50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

　　2.4干扰试验分别精密量取对照品溶液、供试品溶液、空白溶剂20μL，注入液相色谱仪，结果空白溶剂无干扰峰，见图1。

　　2.5线性关系精密称定甲硫氨酸对照品约100mg和维生素B1对照品约10mg，置同一10mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，分别取上述溶液0.6、0.8、1.0、1.2、1.4mL，分别置10mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，取上述溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，以对照品溶液质量浓度（ρ）为横坐标，测得峰面积值（A）为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：甲硫氨酸A=5.597×106ρ+2.493×105,r=0.9996;维生素B1A=1.163×107ρ+2.147×104,r=0.9998。　　

　　结果表明甲硫氨酸在0.60～1.40mg/mL质量浓度范围内与峰面积呈良好线性关系；维生素B1在006~0.14mg/mL质量浓度范围内与峰面积呈良好线性关系。

　　2.6精密度试验和稳定性试验取同一份对照品溶液，分别重复进样6次，每次进样20μL，结果甲硫氨酸和维生素B1RSD分别为0.89%和1.13%。

　　A.对照品;B.样品;C.空白溶剂　1、维生素B12、甲硫氨酸